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pcr实验室仪器设备(要做(mRNA)RT PCR,需要的仪器有哪些?)

时间:2024-06-12 作者: 小编 阅读量: 1 栏目名: 实验室仪器

其实时荧光PCR仪刚进入中国不久,孔间能使用不同温度是其特色。PCR仪是个简单的东东,一个温控设备和一个检测设备而已。关于温控,主要是介质问题。关于功能,所有的PCR仪功能都大体相同。做RT需要1,很干净整洁的实验环境,RNA提取对操作环境的要求很高。3,1.5ml管冷冻离心机。4,移液枪1ml、200ul、10ul一套,最好专用。8,如果样品不会立即进入下一步实验,建议具备超低温冰箱。

PCR仪有哪些种类,如何选购?

【PCR仪的种类】
分类总是五花八门,总体来说可以分为PCR扩增仪和实时荧光PCR仪两大类,有人也把它们称为半自动和全自动,或者定性和定量,都是比较不准确的称呼。

PCR最重要的就是个升降温过程,最初的水浴锅式PCR,就是三个水浴箱,一个机械臂,定时抓出反应槽转换水浴锅。这种东东体积大,迅速慢,但其实结果并不比以后的PCR仪差,我现在都很欣赏。后来有人利用致冷和加热做成了,固定位置升降温的PCR扩增仪。

后来随着定量技术的发展,有公司将扩增仪和检测做成一体,也就成了现在所谓的全自动(或定量)PCR仪。当然标准的叫实时荧光定量PCR仪。

【品牌】

什么东西都有品牌,现在国内国外PCR仪的品牌很多,就国外而言比较著名的有:

ABI美国应用生物公司:老牌的生物公司贵族,其收购了原来的PE,而PE公司是PCR的鼻祖,旗下有很多经典的PCR仪,有5700(已停产)、7700(已停产)、7000、7900等实时荧光定量PCR仪。

ROCHE罗氏诊断:炙手可热的新贵,LIGHTCYCLER是其唯一的PCR仪,市场做得很不错,以科研定位为主,但在国内很多医院使用,其很特色离心、气加热、毛细管等,设计另类,是最有特色的PCR仪,当然好坏另议,就单其另辟蹊径的技术能力和胆识就值的佩服。

MJ:刚入中国的名流,MJ的扩增仪在生命科研领域比较出名,其产品比较适合高通量检测,人类基因组计划用得很多。其实时荧光PCR仪刚进入中国不久,孔间能使用不同温度是其特色。这点其实比较有用。

伯乐:呵,廉价的麦当劳,ICYCLER是其主打,进入中国已经比较久了,产品和5700一样,是扩增仪上加装定量模块而成,特点是价格较低。

国内现在做的也很多,比如杭州博日、杭州朗基、上海枫岭、厦门安普利等。

【选购】

准确的讲包括实时荧光定量在内都没有自动加样和标本处理系统,只能算半自动的。PCR仪是个简单的东东,一个温控设备和一个检测设备而已。

关于温控,主要是介质问题。理想的介质是导热性好、比热大、接触紧密的东东。

这方面最好的是水浴和油浴,比热大(油比水更大)、溶剂化物体,与反应物无缝接触,效果当然最好。但是自动化,小型化难,只有最初的水浴锅式使用。

硅加热,这是使用最普遍的一种,优点:易自动化、速度快、直接加热降温,效果当然好,但是第一成本较高,第二其使用的介质是金属,导热虽然好,但是与反应管,很难做到无缝接触,定性时代可以加油,但用荧光定最,由于油有荧光信号不能用。所以在无缝接触上差一些。第三由于是底部加热,下部压力较大,有溢出的可能,不过新的仪器在加热盖以后解决了这个问题。

空气加热,用空气做介质有优点,与反应体系无缝接触,但是空气的导热性差、比热小的弱点明显。因此空气加热的要利用离心来产生空气流动,增强导热性,同时使用毛细管,加大接触面积、试剂微量化来弥补。这样做了以后效果还是不错。但有的厂商把什么离心、毛细管的好处大讲特讲,对气加热的弱点闭口不谈,却是高明的市场手法。同时,使用离心,对标本量增大是有影响的并且标本量越大,空气比热小的弱点就越明显,所以空所加热的仪器标本量都比较小。使用毛细管后由于反应液与管的接触面积增大,吸附现象更大,因此试剂的通用性差一般要专门开发,成本高,虽然试剂用量少,但因为是专用试剂,每人份就是以实际量算,并不省试剂。反而增加了毛细管成本。

关于功能,所有的PCR仪功能都大体相同。只有MJ孔间能使用不同温度比较独特,这对于多项目同时检测以及循环参数的调整比较有用。但其实时荧光的仪器刚进入中国不久,具体如何还不得而知。

关于选购,根据单位情况而定,由于PCR的技术含量其实并不高,好的国产仪器如杭州博日(与日本著名厂商大和有关)也差不太多。关于进口仪器,罗氏的仪器不错,但如果标本量大,建议不要用罗氏。一则会累死的。另外,每个标本要分摊的标准曲线、对照成本太高。同时,试剂也比较受限。

要做(mRNA)RT PCR,需要的仪器有哪些?

首先,RT不是证明RNA有无表达的很好方法,RT批不出来会有很多原因,并不仅仅是没有模板。建议你做northern。
做RT需要
1,很干净整洁的实验环境,RNA提取对操作环境的要求很高。
2,电动组织分散仪(IKA公司的T10那种)或研钵+液氮或玻璃组织研磨器,以上提取效果递减。
3,1.5ml管冷冻离心机。
4,移液枪1ml、200ul、10ul一套,最好专用。
5,紫外分光光度计、石英狭缝比色皿。
6,核酸电泳仪、电泳槽(电泳槽最好专用)
7,RNase free的各式枪头、1.5ml离心管;RNase free的双蒸水。
8,如果样品不会立即进入下一步实验,建议具备超低温冰箱。

分子生物学实验室常规仪器有哪些?

普通PCR仪、荧光PCR仪、高速离心机、超速离心机、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、电子天平、4度/-20度冰箱、液氮罐、超净台、摇床、烘箱、水浴锅、研磨器、酒精灯、试管架、涂布棒、移液枪、各种玻璃仪器、灭菌锅、分光光度计(或者核酸检测仪)、杂交炉,还有就是各种耗材

pcr实验室都需要哪些仪器

除了PCR仪和凝胶成像仪,还有电泳仪、微型离心机、漩涡振荡器,当然,要是想精细,还得有制作纯水的设备

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